Desarrollo de un sistema inmunoconjugado de nanopartículas metálicas para el diagnóstico de dengue

Abstract

Introducción: Actualmente, el diagnóstico de la infección por el virus del Dengue se basa en la RT-PCR y otras técnicas serológicas, con limitantes económicas, de sensibilidad y especificidad. Además, su utilización se ve limitada en grandes brotes debido a su elevado costo y a la baja disponibilidad. El desarrollo de nanoplataformas como sistemas de diagnóstico tiene un uso potencial para este fin. Objetivo: Evaluar la capacidad colorimétrica para la detección de la proteína NS1 del virus del Dengue, asistidas con nanoplataformas metálicas (Fe3O4). Métodos: Se sintetizaron y funcionalizaron nanopartículas de hierro (Nps), las cuales fueron caracterizadas por FTIR, DLS y STEM. Se diseñó un sistema tipo ELISA conjugando las Nps con anticuerpos anti-NS1 del Dengue virus. Esta proteína se obtuvo de los sobrenadantes de cultivos de U937.DC.SIGN infectados con el serotipo 2. La reacción positiva se evaluó y reveló por tinción de Perls. Resultados: Se obtuvieron Nps magnéticas con las características de tamaño, forma y estabilidad apropiadas para el diseño de la nanoplataforma. Sólo las muestras positivas con la proteína NS1 reaccionaron con el inmunoconjugado Nps-Ab, mostrando un cambio de color azul característico y reproducible con una diferencia significativa p < 0.001. Conclusión: Se logró demostrar que las Nps metálicas utilizadas en un sistema colorimétrico son capaces de detectar la proteína NS1 producida por el virus del Dengue. La nanoplataforma tiene un uso potencial como herramienta de diagnóstico.