Escaneo cromatográfico de las proteínas de filtrado de cultivo de Mycobacterium tuberculosis H37Rv

Abstract

El estudio del proteoma de Mycobacterium tuberculosis H37Rv es de gran importancia en la meta de mejorar el diagnóstico, tratamiento y prevención de la tuberculosis. Una fracción importante del proteoma micobacteriano la constituyen las proteínas del filtrado de cultivo líquido, de las cuales sólo se han identificado 136 y sus diversas isoformas y una pequeña fracción de ellas ha sido purificada por medio de cromatografía y estudiada en su forma nativa. En este trabajo se evaluó la adsortividad de las proteínas de filtrado de cultivo líquido de Mycobacterium tuberculosis H37Rv hacia ocho matrices cromatográficas con el fin de aislar antígenos de importancia patogénica. Los resultados negativos en los ensayos de adsorción con adsorbentes sacáridos y con agarosa-jacalina, sugirieron la ausencia de lectinas afines a galactosa, glucosa, N-acetilgalactosamina y a las cadenas oligosacáridas de fetuína, así como de proteínas con N-acetilgalactosamina, respectivamente. Finalmente, los ensayos de adsorción con matrices de afinidad a metales e interacción hidrofóbica permitieron el diseño de un esquema cromatográfico de dos etapas, utilizando los adsorbentes Sefarosa fenilada y agarosa di-(2-picolil) amina, para el aislamiento del complejo 85, uno de los principales antígenos micobacterianos de importancia inmunológica. Por su simplicidad, buena resolución y rendimiento, el esquema de aislamiento diseñado en este trabajo constituye una herramienta importante para el estudio proteómico e inmunológico de antígenos micobacterianos.